小鼠感染BVDV诱导NLRP3炎症小体的表达及其对病毒复制的影响
2022-09-12分类号:S852.65
【部门】黑龙江八一农垦大学动物科技学院 黑龙江省牛病防控工程技术研究中心
【摘要】为分析小鼠感染牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)诱导的NLRP3炎症小体表达情况及其对病毒复制的影响,选用40只4~6周龄雌性SPF级BALB/c小鼠,随机分成8组,其中BVDV接种小鼠7组,对照1组,每组5只。应用105 TCID50的CP型BVDV腹腔感染小鼠后,分别在感染后0、6、12、24、48、96、168和240h采集小鼠的肠道、脾脏和血液,通过qRT-PCR和Western Blot方法对小鼠十二指肠中NLRP3、IL-1β和Caspase-1分别进行基因及蛋白水平的检测。应用qRT-PCR方法确定不同时间点小鼠十二指肠和血液中的病毒载量,同时于感染后第168h检查十二指肠和脾脏病理组织变化。结果表明:1)小鼠感染BVDV早期(6、12和24h)组织中的NLRP3、IL-1β和Caspase-1基因转录水平逐步升高,48h未见明显变化,同时感染24h时,蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05);2)小鼠感染BVDV后期(96、168和240h)NLRP3、IL-1β和Caspase-1的基因转录水平呈现下降趋势,168h时转录和蛋白水平降低最为显著(P<0.05);3)感染小鼠十二指肠、脾脏和血液的病毒载量均在168h达到高峰;第168h采集的小鼠十二指肠有大量炎性细胞浸润,脾脏淋巴细胞变性和坏死,证明BVDV感染模型成立。综上,NLRP3炎症小体在BVDV感染早期被激活,然而,随着病毒载量的增加,可能对其活性有一定的抑制作用。
【关键词】牛病毒性腹泻病毒 BALB/c小鼠 NLRP3炎症小体 病毒载量
【基金】国家自然科学基金项目(32072896);; 黑龙江省博士后落户科研启动金(2032030150);; 黑龙江八一农垦大学研究生创新科研项目(YJSCX2021-Y16)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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