【摘要】【目的】探究咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester,CAPE）通过AMPK/FOXO3a信号通路缓解氧化应激对猪精液的影响及其分子机制。【方法】选取8头成年（1—2岁）、健康状况良好长白种公猪进行鲜精采集，将质检合格的样品混池待用。试验设计如下：首先，在常温基础稀释液中分别添加0、0.02、0.04、0.06、0.08和0.10 g·L~(-1)浓度的CAPE，将精液样品与各个浓度组依次混合后放置室温平衡，随即转入17℃电子恒温冰箱进行常温保存。全自动精子分析仪（CASA）测定1—5 d精子运动学参数（总活率与渐进性活力），筛选出最佳适宜浓度为0.06 g·L~(-1)。其次，将0.06 g·L~(-1) CAPE与400μmol·L~(-1)的H_2O_2建立氧化胁迫模型，在第1、3、5天分别采用CASA测定精子总活率与渐进性活力，荧光探针技术评估质膜完整性与顶体完整性，抗氧化试剂盒检测过氧化氢酶（catalase,CAT）与超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性，在第5天利用实时荧光定量PCR技术测定AMPK/FOXO3a信号通路下游靶向基因（AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT）及凋亡基因BAX的mRNA表达水平，蛋白免疫印记技术测定AMPK、p-AMPK蛋白表达。【结果】（1）浓度筛选试验中，0.06 g·L~(-1)的CAPE在保存第3天显著提高精子的总活率并维持至第5天（P<0.05），不仅如此，精子的渐进性活力在第1天显著高于其他处理组（P<0.05）。（2）氧化胁迫试验中，H_2O_2处理组的精子质膜完整性、顶体完整性、总活率、渐进性活力、SOD与CAT活性在保存的第5天均极限显著低于空白组与CAPE+H_2O_2混合组（P0.05）。与CAPE+H_2O_2混合组相比，H_2O_2处理组AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT的mRNA表达水平显著降低（P<0.05),BAX的表达水平显著升高（P0.05）。在蛋白表达水平中，CAPE+H_2O_2混合组与H_2O_2组相比，AMPK、p-AMPK与p-AMPK/AMPK比率显著提升（P