拟无枝酸菌宿主构建及次级代谢基因簇异源表达
2022-05-05分类号:Q78;TQ920.6
【部门】上海交通大学微生物代谢国家重点实验室
【摘要】为将生长快、发酵时间短、遗传操作便捷的稀有放线菌拟无枝酸菌TNS106开发成异源表达宿主,通过同源重组将内源的瑞斯托霉素生物合成关键基因rpsA替换为ΦC31和ΦBT1噬菌体细菌附着位点attB,清除代谢背景并引入整合位点,得到菌株HXR1;将含有来自天蓝色链霉菌的放线紫红素基因簇或来自刺糖多孢菌的多杀菌素基因簇的质粒转到HXR1进行异源表达,检测发酵产物。结果显示,HXR1成功表达放线紫红素和多杀菌素;与红色糖多孢菌宿主LJ161相比,放线紫红素的产生提前1 d,产量提高1.3倍。拟无枝酸菌异源表达宿主HXR1可为从链霉菌和稀有放线菌中发现新的次级代谢产物提供有用的平台。
【关键词】药物研发 稀有放线菌 拟无枝酸菌 异源表达 放线紫红素 多杀菌素 抗生素 次级代谢产物
【基金】国家重点研发专项(2018YFA0901900);; 上海抗生素耐药研究联合创新中心项目(19430750600)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报(自然科学版)
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