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鳜脑组织细胞系的建立及其病毒敏感性研究

2022-06-29分类号:S943

【作者】罗晓雯  曾令兵  江南  艾桃山  范玉顶  李波  谢德兵  孟彦  周勇  
【部门】中国水产科学研究院长江水产研究所  武汉市农业科学院  
【摘要】鱼类细胞是开展鱼类病毒分离鉴定、功能基因分析以及生物制品制备等研究的重要物质基础。鳜(Siniperca chuatsi)是深受养殖者和消费者欢迎的养殖品种。随着鳜鱼养殖产量的逐年增加,其病害问题尤其是病毒病问题也日趋严重,但是,可用于鳜鱼病毒分离和基因功能分析的鳜细胞系缺乏。本研究采用组织块消化法,对来源鳜脑组织的细胞进行原代培养,建立了鳜脑组织细胞系,命名为MFB。MFB细胞在28℃含10%胎牛血清的L-15中已稳定传代超过70次,第25代鳜脑组织细胞的染色体众数为56。采用免疫荧光细胞化学技术(β-tubulin和Neu-N)鉴定MFB细胞的神经元纯度,结果显示,培养的MFB细胞为神经元类细胞。病毒敏感性实验结果显示,鳜蛙虹彩(MFRaIV)、大口黑鲈蛙虹彩(LMBRaIV)和大鲵虹彩病毒(GSIV)均可在MFB细胞中产生典型细胞病变效应,病毒滴度分别为10~(8.68±0.12)、10~(8.36±0.15)、10~(10.15±1.85) TCID_(50)/mL。使用脂质体Lipofectamine~(?)2000将pEGFP-N1转入MFB细胞,转染效率可达20%。本研究建立的鳜脑组织细胞系不仅对多种蛙虹彩病毒敏感,而且转染质粒效率较高,为鳜病毒性病原的分离及基因功能研究奠定了前期基础。
【关键词】鳜  脑组织  细胞系  生物学特性  病毒敏感性
【基金】国家重点研发计划资助(2019YFD0900105);; 湖北省技术创新专项(2018ABA101);; 中国水产科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(2020TD44);; 国家淡水水产种质资源库(FGRC18537)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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