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WNT6基因对蛋鸡卵泡颗粒细胞的影响及机制研究

2022-04-20分类号:S831

【作者】祝启钊  谢晓磊  杨海霞  王晋  片慧芳  虞德兵  
【部门】南京农业大学动物科技学院  
【摘要】[目的]本研究旨在明确WNT6基因在蛋鸡卵泡发育过程中的生物学功能,并对其作用机制进行初步探究。[方法]本研究以300d海兰蛋鸡为研究对象,首先检测了WNT6 mRNA在不同组织中表达特征;同时对体外培养的鸡卵泡颗粒细胞进行敲减和过表达WNT6基因后,经CCK8检测细胞增殖和ELISA检测细胞培养基中的孕酮(P4)含量,以及荧光定量PCR检测卵泡刺激素受体(FSHR)和StAR、CYP11A1等基因表达量;另外,设立卵泡刺激素(FSH)浓度梯度处理体外培养的蛋鸡卵泡颗粒细胞,研究FSH对WNT6和WNT通路相关基因表达量的影响。[结果]结果显示,WNT6 mRNA在蛋鸡卵泡颗粒细胞内特异表达,且在处于卵泡选择关键时期的小黄卵泡颗粒细胞内具有最高表达水平;与对照组相比,过表达WNT6极显著促进颗粒细胞增殖(P<0.01),极显著提高了颗粒细胞P4合成量(P<0.01),并显著提高FSHR、CYP11A1、StAR、CYP19A1和HSD3B1基因表达量(P<0.05);与之相反,敲减WNT6后颗粒细胞增殖被抑制(P<0.01),P4合成量极显著显著减少(P<0.01),并显著降低FSHR、CYP11A1、StAR、CYP19A1和HSD3B1基因表达量(P<0.05);与此同时,本研究还发现,FSH呈剂量依赖性促进WNT6基因表达(P<0.05),FSH还可显著提高颗粒细胞LRP1基因表达量(P<0.05)并极显著降低FOXO1基因表达量(P<0.01)。[结论] WNT6在蛋鸡卵泡颗粒细胞内特异性表达,且其表达水平受FSH调控,WNT6促进颗粒细胞增殖与类固醇激素合成,并提高颗粒细胞FSHR基因表达表达水平。本研究结果提示,WNT6协同FSH促进蛋鸡卵泡发育并调控蛋鸡卵泡选择
【关键词】WNT6  颗粒细胞  卵泡选择  卵泡刺激素
【基金】江苏省农业科技自主创新资金项目[项目编号:CX(17)3014]
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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