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半滑舌鳎Cs-UBE2D4基因的克隆、表达模式及启动子活性分析

2022-04-05分类号:S917.4

【作者】程鹏  陈张帆  徐文腾  王娜  杨倩  巩志宏  崔忠凯  胡元日  陈松林  
【部门】上海海洋大学水产与生命学院  中国水产科学研究院黄海水产研究所海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室  山东省海洋渔业生物技术与遗传育种重点实验室  中国海洋大学海洋生命学院  
【摘要】泛素-蛋白酶体系统作为重要的蛋白质修饰途径参与多个生物学过程,其中泛素结合酶E2作为关键酶可以决定泛素化对靶蛋白的影响。为了探究泛素结合酶E2在半滑舌鳎雌性性腺发育中的作用,本研究克隆了半滑舌鳎Cs-UBE2D4基因的开放阅读框ORF,检测了该基因在不同组织和不同发育阶段性腺中的表达模式;构建了其启动子报告基因载体(pGL3-Cs-UBE2D4)并进行了启动子活性分析。Cs-UBE2D4开放阅读框为360 bp,编码119个氨基酸,含有保守的泛素结合酶E2结构域。荧光定量PCR结果显示,Cs-UBE2D4在雌鱼中的各组织中广泛表达,其中在卵巢和肝脏中表达量较高,而在雄鱼中几乎检测不到表达;在卵巢各发育阶段中,该基因的表达量从90日龄开始上调,6月龄时期达到峰值,之后开始下调,在1.5龄时期表达量最低,在3龄时表达量有所回升,其中6月龄表达量为90日龄表达量的1.97倍(P<0.05)。双荧光素酶活性检测结果显示,Cs-UBE2D4启动子具有较强的转录活性。本研究将为进一步开展Cs-UBE2D4基因对半滑舌鳎卵巢发育和性别调控相关机制的研究提供理论基础。
【关键词】半滑舌鳎  泛素-蛋白酶体系统  卵巢发育  UBE2D4基因
【基金】国家自然科学基金(31730099);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2020TD20);; 泰山学者攀登计划项目
【所属期刊栏目】水产学报
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