火炬松体细胞胚胎发生体系的优化
2022-05-23分类号:S791.255
【部门】江西省林业科学院 南京林业大学南方现代林业协同创新中心 安福县武功山林场
【摘要】[目的]建立和优化火炬松体胚发生技术体系,为火炬松优良基因型体胚繁育及遗传转化体系建立提供技术支撑。[方法]以火炬松优良基因型的未成熟合子胚为材料,从基因型、球果采集期、基本培养基、植物外源激素组合及浓度等方面对胚性愈伤组织诱导条件进行优化;选取增殖效果好、具有胚性胚柄细胞团(ESM)的胚性愈伤组织开展体胚成熟的正交试验,选择发育正常的子叶胚进行萌发,8周后移栽。[结果]基因型、球果采集期、基本培养基和外源激素(PGR)组合及浓度等因子均对胚性愈伤组织诱导有不同程度的影响。火炬松6种基因型中荣山52胚性愈伤组织诱导率最高,达63.33%;处于裂生多胚期的合子胚为外植体的最佳采样期(7月20日左右);6种基本培养基中,在DCR基本培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,达40.00%;不同PGR组合及浓度中,以0.5 mg·L~(-1) 6-BA+1.0 mg·L~(-1) 2,4-D+2.0 mg·L~(-1) NAA+5.0 mg·L~(-1)ABA的胚性愈伤组织诱导率最高,达50.00%。胚性愈伤组织在基本培养基MLP上培养14 d后,转入含有ABA 8.0 mg·L~(-1)、PEG 8 000 140 g·L~(-1)以及麦芽糖40.0 g·L~(-1)的体胚成熟分化培养基上,体胚发生数平均为411个·g-1,体胚萌发率可达93.33%;体胚苗移栽成活率可达86.30%。[结论]本研究优化了火炬松胚性愈伤组织诱导与体胚发生技术体系,体胚诱导率显著提升,为火炬松良种规模化繁育及遗传转化提供技术支撑。
【关键词】火炬松 未成熟合子胚 胚性愈伤组织 体细胞胚胎发生 体胚萌发
【基金】江西省重点研发计划项目(20203BBF63022);; 江西省林业局林业科技创新专项经费(201601)
【所属期刊栏目】林业科学研究
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