黄曲霉毒素B_1高灵敏定性定量免疫层析检测方法的建立
2022-05-16分类号:S859.84
【部门】浙江大学医学院 浙江农林大学动物科技学院/动物医学院 浙江省检验检验科学技术研究院 浙江大学动物科技学院
【摘要】【目的】真菌毒素可污染农产品和动物源性食品,其中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)毒性强、危害大,建立AFB_1快速、高灵敏和便捷的检测方法对于监测相关产品中AFB_1污染水平,保障人和动物健康均具有重要意义。本研究基于侧向层析技术原理,采用竞争模式,优化建立免疫层析检测方法,以实现AFB_1的快速定性检测和定量分析。【方法】通过比较分析不同粒径金颗粒标记抗体效果,优化确定免疫层析各组分材料类型、相关缓冲液配方及最佳使用质量浓度,建立AFB_1高灵敏定性定量免疫层析检测方法。【结果】优化建立的AFB_1免疫层析检测法在实际样本中的定性和定量检测限分别为2.5和0.5μg·kg~(-1),灵敏度高、特异性强,与其他常见真菌毒素无交叉反应,加标回收实验结果显示:该方法准确稳定,且对AFB_1天然污染样本的定量检测结果与商品化试剂盒及LC-MS/MS一致性较好。【结论】本研究制备的免疫层析检测法可用于样本中AFB_1污染的快速定性检测与定量分析,适合缺乏实验条件的基层检验检疫机构和农产品加工企业对大量样本进行快速筛查,样本检测结果疑似阳性再采用仪器法进行确认,可降低检测成本,提升检测效率,同时为建立其他病原微生物免疫层析检测方法提供参考。图9表2参26
【关键词】定性检测 定量分析 黄曲霉毒素B_1 免疫层析 单克隆抗体
【基金】浙江省重点研发计划项目(2021C02058);; 国家自然科学基金资助项目(32002358);; 国家级大学生创新创业训练计划项目(202010341040)
【所属期刊栏目】浙江农林大学学报
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