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暗紫贝母鲨烯合酶基因的克隆及其组织表达分析

2021-12-28分类号:S567.231

【作者】王威威  李德鑫  李秋娥  廖海  张富丽  周嘉裕  
【部门】西南交通大学生命科学与工程学院  四川省农业科学院分析测试中心  
【摘要】【目的】:克隆名贵药材暗紫贝母(Fritillaria unibracteata)鲨烯合酶(Squalene synthase, SQS)基因的全长ORF序列(FuSQS),并对其进行生物信息学分析和不同组织表达水平分析。【方法】利用PCR方法,克隆得到FuSQS,利用生物信息学方法预测FuSQS蛋白的基本理化性质、保守结构域、二级及三级结构等蛋白特性,利用Clustal W和MEGA 7.0分别进行氨基酸序列对比和系统进化分析,通过Real-time PCR分析FuSQS在暗紫贝母不同组织的表达水平。【结果】FuSQS长度为1230 bp(GenBank登录号MW365404),编码1条长度为409个氨基酸残基的肽链,相对分子质量为46.84 kDa,等电点(pI)为6.33,含有法尼基焦磷酸结合口袋和Mg~(2+)结合位点等保守结构域。系统进化树表明FuSQS与油棕、宽瓣重楼、水稻、玉米等单子叶植物进化关系较近。Real-time PCR结果显示,FuSQS在不同组织中表达量有显著差异。【结论】FuSQS的克隆、生物信息学分析及其在鳞茎中的高表达特征,这为进一步研究FuSQS在暗紫贝母生物碱生物合成途径的调控机制提供科学依据。
【关键词】暗紫贝母  鲨烯合酶  基因克隆  表达分析
【基金】国家自然科学基金青年科学基金项目(31500276);; 四川省重点研发项目(2018SZ0061);; 四川省创新能力提升工程公益深化项目(2016GYSH-032);; 成都市科技局重点研发计划(2019-YF05-02257-SN);; 四川省中医药管理局项目(2020JC0128)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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