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他克林对脂多糖诱导小鼠睾丸支持细胞炎性损伤的保护作用

2022-02-21分类号:S859.7

【作者】蔡金霞  黄明光  胡传活  张鑫  梁莹莹  纪伟霞  冯妮  葛晨玲  陈志英  李珣  王晓晔  
【部门】广西大学动物科学技术学院  广西畜牧研究所  
【摘要】【目的】分析他克林对脂多糖(LPS)诱导小鼠睾丸支持细胞(TM4)炎性损伤的保护作用,从炎症角度探索他克林的功能,为动物生产过程中雄性动物生殖疾病相关抗炎药物的利用及精子质量提升提供更多药物选择。【方法】采用CCK8法检测0.01、0.10、1.00、10.00和100.00 μg/mL LPS分别诱导3.0、6.0、12.0和24.0 h对TM4的适宜损伤条件;同时分析0.01、0.10、1.00、10.00、100.00、1000.00、10000.00和100000.00 μg/mL他克林在加入LPS前预处理0.5、1.0和2.0 h或加入LPS后处理0.5、1.5、3.0、6.0、12.0和24.0 h对TM4炎性损伤的适宜保护条件。以荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测TNF-α和IL-6基因mRNA表达水平,以ELISA法进一步评价细胞上清TNF-α和IL-6蛋白表达量,以免疫蛋白印迹(WB)法分析NF-κB蛋白表达量。【结果】不同浓度不同处理时间下,LPS对TM4增殖的影响情况存在差异,其中1.00 μg/mL LPS处理12 h TM4的增殖率极显著低于空白组(P0.05)。【结论】0.01 μg/mL他克林后处理6.0 h对TM4的保护作用最佳,其机制可能与IL-6和TNF-α基因mRNA及蛋白表达量下调有关。
【关键词】他克林  脂多糖  小鼠睾丸支持细胞  炎性损伤
【基金】国家自然科学基金项目“陆川猪精子去获能蛋白的分离鉴定及作用机理研究”(31660700);; 广西自然科学基金项目(2016GXNSFAA380024)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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