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草海桐铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆及序列分析

2022-02-18分类号:Q943.2

【作者】张静文  张力文  严云香  常义  陈艳  李欣勇  
【部门】海南师范大学生命科学学院/热带岛屿生态学教育部重点实验室  中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所  
【摘要】【目的】铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)在保护细胞和组织免受氧化损伤方面起重要作用。对滨海植物草海桐盐胁迫诱导的Cu/Zn-SOD进行克隆和序列分析,为揭示草海桐适应盐碱环境提供理论依据。【方法】以盐胁迫的草海桐为材料,运用RACE技术克隆草海桐Cu/Zn-SOD,命名为SsCSD,采用生物信息学方法进行序列分析,构建pBinGlyRed-SsCSD重组质粒。【结果】通过RACE技术获得SsCSD基因全长共1148 bp,其最大开放阅读框(ORF)为687 bp,编码228个氨基酸。氨基酸保守结构域分析表明,该序列具有铜锌超氧化物歧化酶保守结构域,属于SOD家族。生物信息学分析表明其定位于叶绿体中,氨基酸序列分析显示其与已知植物叶绿体Cu/Zn-SOD的氨基酸残基高度同源。同时将SsCSD基因与植物表达载体pBinGlyRed进行重组,并成功转入农杆菌GV3101中。【结论】草海桐铜锌超氧化物歧化酶氨基酸序列与同源物种相似度高,在进化上高度保守,对进一步通过转基因验证该酶生物学功能具有重要意义。
【关键词】草海桐  Cu/Zn-SOD  基因克隆  序列分析
【基金】海南省自然科学基金(2019RC181);; 海南师范大学博士教授科研启动项目(301060181825)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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