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团头鲂IL-12表达及功能的初步研究

2021-12-24分类号:S917.4

【作者】武佳琪  王济秀  刘红  
【部门】华中农业大学水产学院农业农村部淡水生物繁育重点实验室长江经济带大宗水生生物产业绿色发展教育部工程研究中心  
【摘要】为探究白介素-12(IL-12)在鱼类免疫过程中发挥的功能,实验以团头鲂为研究对象,克隆了团头鲂IL-12的4个亚基IL-12A、IL-12Ba、IL-12Bb和IL-12Bc的开放阅读框(ORF)序列,长度分别为588、993、939和837 bp。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果显示,团头鲂IL-12各亚基在检测的10个不同的成鱼健康组织中都有表达,但是在不同组织中的表达模式不同;腹腔注射嗜水气单胞菌后,团头鲂IL-12各亚基在免疫相关组织中显著差异表达;脂多糖(LPS)刺激分离的团头鲂头肾淋巴细胞后,4个IL-12亚基均被快速诱导表达。进一步通过大肠杆菌原核表达系统和变性复性方法得到团头鲂IL-12Bb、IL-12Bc重组蛋白并刺激分离的头肾淋巴细胞,显著上调TNF-α、IL-1β、IFN-γ的表达,表明获得的重组蛋白具有生物学活性。最后对获得的蛋白进行抑菌活性检测,结果表明,重组IL-12Bb、IL-12Bc单体蛋白对嗜水气单胞菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有明显的抑制作用。综上,本研究结果表明,团头鲂IL-12在调节免疫应答的过程中发挥着重要作用。
【关键词】团头鲂  白介素12  细菌刺激  基因表达  原核表达  抑菌活性
【基金】国家自然科学基金(31972781);; 现代农业产业技术体系国家大宗淡水鱼产业技术体系建设专项(CARS-46-08)
【所属期刊栏目】水产学报
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