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枯草芽孢杆菌SX3411羊毛硫细菌素Subtilomycin结构基因subA的原核中串联表达和抗体制备

2021-12-28分类号:Q78

【作者】丰磊  魏伟群  钟雪晴  付鸣佳  肖世平  叶德晓  黄紫妍  
【部门】江西师范大学生命科学学院  江西天佳生物工程股份有限公司  
【摘要】为了提高枯草芽孢杆菌SX3411菌株羊毛硫细菌素Subtilomycin前体基因subA表达产物的抗原性,采用化学合成的方法合成了SubA的3次重复串联体3×subA基因,构建了该基因的原核表达载体并转入大肠杆菌中。结果表明,3×subA基因在大肠杆菌中获得了融合表达。利用SDS-PAGE纯化大肠杆菌中融合表达的3×SubA,免疫家兔后制备抗体anti-3×SubA,该抗体经检测有较高的滴度。通过Western Blotting杂交,检测了Subtilomycin前体多肽SubA的胞内表达特性。结果表明,枯草芽孢杆菌SX3411在30℃培养的条件下进行不同时间取样检测,枯草芽孢杆菌3411约在培养的第10,12小时胞内有较多的SubA表达。综上所述,通过串联表达Subtilomycin前体基因subA所获得的融合表达产物3×SubA具有较好的抗原性,以此获得的抗体anti-3×SubA完全可以用于枯草芽孢杆菌SX3411中Subtilomycin前体检测和分析。
【关键词】枯草芽孢杆菌SX341  羊毛硫细菌素  Subtilomycin  SubA蛋白表达  抗体制备
【基金】国家自然科学基金(31760601);; 南昌市重大科技攻关项目(2020)
【所属期刊栏目】华北农学报
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