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海州常山叶片实时荧光定量PCR的内参基因选择

2022-03-29分类号:S685.99

【作者】华雅洁  岳远征  杨秀莲  何卿  
【部门】南京林业大学南方现代林业协同创新中心  江苏省环境科学研究院江苏省环境工程重点实验室  
【摘要】[目的]通过实时PCR(qRT-PCR)筛选海州常山叶片不同非生物胁迫条件下稳定的内参基因。[方法]利用已有的转录组数据,筛选出17个候选内参基因,在不同非生物胁迫(盐害、干旱和热害)下进行qRTPCR,通过利用GeNorm、NormFinder、BestKeeper及ReFinder软件分析筛选不同胁迫中最适的内参基因,选择CtNHX1基因,验证所筛选的内参基因的稳定性。[结果]RPL、AP-2盐害胁迫下最稳定,MDH、AP-2干旱胁迫下最稳定,UBCE2、ACT热害胁迫下最稳定;综合来看,非生物处理中,AP-2、UBCE2是最稳定的参考基因。[结论]AP-2、UBCE2可作为海州常山叶片非生物胁迫研究中基因定量使用的内参基因,为进一步开展海州常山分子机制研究、耐盐基因的开发利用奠定基础。
【关键词】海州常山  胁迫  内参基因  实时荧光PCR
【基金】江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(NJ-066);; 国家林业局公益性行业科研专项项目(201404109);; 江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
【所属期刊栏目】林业科学研究
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