马泰勒虫RON2基因的原核表达及生物信息学分析
2021-06-11分类号:S852.72
【部门】新疆农业大学动物医学学院
【摘要】[目的]对马泰勒虫棒状体颈部蛋白2(RON2)进行原核表达和生物信息学分析,为后续蛋白互作试验提供材料基础。[方法]以马泰勒虫新疆分离株为研究对象,克隆其RON2基因,并与GenBank中已知的马泰勒虫美国WA株基因组数据和顶复门原虫RON2基因序列本地数据库进行BLAST比对,确定其进化关系。构建重组表达载体pET-32a-RON2,融合表达重组蛋白,对RON2基因编码蛋白进行生物信息学分析。[结果]马泰勒虫新疆株RON2基因(NCBI登录号MT939257)长3 920 bp,高度保守,与顶复门原虫RON2基因核苷酸和氨基酸序列的相似性分别为31.2%~82.7%和23.8%~79.5%。成功构建原核表达重组质粒,获得的RON2融合重组蛋白分子质量为26 ku,为包涵体蛋白。生物信息学分析表明,RON2蛋白是一种碱性、不稳定亲水性跨膜蛋白,二级结构以α螺旋为主,亲水性较差,抗原性较弱,与其他顶复门原虫RON2蛋白具有相似的三级空间特殊结构和氨基酸序列,且可能与其他入侵蛋白存在相互作用关系。[结论]获得马泰勒虫新疆株RON2基因,诱导表达获得部分RON2融合重组蛋白,该蛋白存在与其他入侵相关蛋白相互作用的位点,可能参与了虫体入侵宿主细胞的过程。
【关键词】马泰勒虫 棒状体颈部蛋白2 原核表达 遗传进化 生物信息学分析
【基金】新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2018D01B18);; 新疆农业大学校前期项目(XJAU201702);新疆农业大学博士后流动站资助项目;; 新疆维吾尔自治区天山青年计划项目(2020Q014)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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