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虾肝肠胞虫(EHP)现场快速高灵敏度检测试剂盒的性能评价研究

2021-10-29分类号:S945.4

【作者】李英瑕  徐婷婷  刘爽  万晓媛  张庆利  
【部门】上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心  中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室  
【摘要】近年来,虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei, EHP)流行使我国养殖对虾遭受严重经济损失,现场快速检测是EHP防控的重要技术保证。本研究对本实验室研发的EHP现场快速检测试剂盒的分析特异性(ASp)、分析灵敏度(ASe)、诊断特异性(DSp)、诊断灵敏度(DSe)、重复性和稳定性6项性能参数开展了系统评估。ASp的测试显示,该试剂盒与对虾白斑综合征病毒(WSSV)、偷死野田村病毒(CMNV)、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)、致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(Vp_(AHPND))、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)等5种对虾常见病原及健康对虾无交叉反应;ASe测试显示,该试剂盒检测下限为10~(1)copies/反应;以EHP TaqMan RT-qPCR方法为标准,比较了试剂盒对298份临床样品的测试结果,试剂盒的DSp为99.2%、DSe为91.7%;试剂盒对EHP阴性样品及强阳性样品的检测重复率为100%,弱阳性样品检测重复率为95.8%;试剂盒在–20℃和–40℃条件下分别可保存7个月和12个月以上。本研究表明,本实验室研制的EHP现场快速检测试剂盒具操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好和稳定性强等优点,可满足对虾养殖现场对EHP的高灵敏度检测。
【关键词】虾肝肠胞虫  环介导等温扩增  试剂盒  现场快速检测  性能参数评价
【基金】国家重点研发计划项目(2017YFC1404503);; 中国水产科学研究院基本科研业务费(2020TD39; 2021XT0602);; 中国水产科学研究院黄海水产研究所级基本科研业务费项目(20603022020005)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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