【摘要】为探究脯氨酰内肽酶(prolyl endopeptidase，PEP)在皱纹盘鲍性腺发育过程中的作用，实验采用荧光定量PCR (qRT-PCR)技术分析皱纹盘鲍不同组织中PEP的表达情况。通过硫酸铵分级沉淀和连续柱层析，从皱纹盘鲍性腺中分离纯化得到高纯度天然PEP。利用LC/MS/MS鉴定肽片段序列，以Suc-Gly-Pro-MCA为底物分析PEP的酶学性质。利用圆二色谱分析温度对PEP结构的影响。采用免疫印迹(Western Blot)和qRT-PCR分析鲍鱼性腺在不同发育时期PEP的蛋白和基因表达水平。结果显示，皱纹盘鲍的性腺中，PEP基因表达量和酶活性最高。利用硫酸铵分级沉淀和连续柱层析，从性腺中分离纯化得到分子量约为82 ku，等电点约为5.5的PEP，LC/MS/MS分析得到502个氨基酸残基，与NCBI中皱纹盘鲍脯氨酰内肽酶(KY214290)一致。PEP的最适温度和最适pH分别为25 ℃和6.0，在15～25 ℃和pH 5～8能够保持较高的酶活力。随着温度升高，PEP的二级结构有明显的改变，拟合热变性温度为（51.4±0.2）℃。PEP在雄性和雌性性腺的各个生长期均能被检测到，在雄性性腺的成熟中期和雌性性腺的成熟后期表达量最高。研究表明，PEP在鲍鱼性腺不同发育时期表达量的差异表明其可能参与到性腺发育的过程。