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草鱼miR-23a在嗜水气单胞菌感染过程中的调控机制

2021-11-24分类号:S943

【作者】包天杰  鲍生成  樊坤  沈玉帮  徐晓雁  李家乐  
【部门】上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室  上海海洋大学水产养殖工程研究中心  上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心  
【摘要】为探索嗜水气单胞菌感染后草鱼肾脏细胞(Ctenopharyngodonidellakideny,CIK)中miR-23a 的调控机制,实验通过实时荧光定量PCR(qPCR)测定了嗜水气单胞菌感染CIK细胞后miR-23a的表达量变化,使用RNAhybrid软件预测miR-23a的靶基因并用双萤光素酶报告基因检测系统进行鉴定,最后分析miR-23a对靶基因下游基因的调控作用。研究发现,在嗜水气单胞菌感染CIK细胞不同时间点,miR-23a表达量产生显著变化;双荧光素酶报告基因实验和miRNA-23a模拟物/抑制剂转染实验对靶基因反向调控,鉴定出TBK1和GLUT1是miR-23a靶基因;过表达miR-23a抑制了下游基因ldha、ldhba、pdha1a和pdha1b的表达水平。实验结果揭示,miR-23a参与调控嗜水气单胞菌感染后CIK细胞中的免疫应答。TBK1和GLUT1是miR-23a靶基因,miR-23a能够靶向GLUT1影响下游基因的表达。以上结果为miR-23a 在硬骨鱼类中免疫反应调控方面作用提供了的重要思路,同时为进一步了解miRNA 介导多个靶基因调节鱼类先天性免疫提供了更多理论依据。
【关键词】miR-23a  草鱼肾脏细胞  嗜水气单胞菌  免疫反应
【基金】国家自然科学基金青年基金(31802285);; 现代农业产业技术体系(CARS-45-03);; 上海市工程中心提升项目(19DZ2284300)
【所属期刊栏目】水产学报
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