农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系
2021-08-30分类号:S664.5
【部门】浙江农林大学林业与生物技术学院 浙江农林大学省部共建亚热带森林培育国家重点实验室
【摘要】【目的】以香榧Torreya grandis ‘Merrillii’幼胚为受体材料,开展农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的遗传转化研究,揭示影响香榧遗传转化的关键因素,以建立农杆菌介导的香榧幼胚遗传转化体系。【方法】以香榧种子突破种鳞后第8周至第11周的幼胚作为转基因受体材料,比较受体胚龄、农杆菌菌液浓度、侵染时间、抗生素质量浓度对遗传转化效率的影响,并采用潮霉素、绿色荧光蛋白GFP表达及GFP基因聚合酶链式反应对遗传转化香榧幼胚培养物进行阳性筛选。【结果】随着香榧幼胚胚龄的增加,抗逆性增强,污染率降低,成活率提高,第10周和第11周幼胚成活率分别为52.1%和52.3%。农杆菌菌液浓度和侵染时间均对香榧幼胚的污染率、成活率、愈伤组织诱导率以及体胚发生率具有显著影响(P
【关键词】香榧 幼胚 农杆菌介导的遗传转化 羧苄青霉素 潮霉素
【基金】浙江省重点研发计划项目(2021C02037);; 中央财政林业科技推广项目([2014]TS 01);; 浙江省科技厅重大专项(2016C02052-12);浙江省科技厅重点研发项目(2018C02004)
【所属期刊栏目】浙江农林大学学报
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