【摘要】为定向获得某种特定的、遗传特性稳定的营养缺陷型菌株,解决产紫杉醇真菌PM6基因改造过程中遗传筛选标记不足的问题,通过基因敲除技术建立高效构建特定营养缺陷型菌株的方法,并将该方法经过简化,作为综合实验"基因敲除法构建产紫杉醇真菌营养缺陷型菌株"应用于本科生实验教学。以构建产紫杉醇真菌腺嘌呤营养缺陷型菌株为例,通过基因同源重组方法定向敲除PM6菌株腺嘌呤合成途径关键基因ADE,利用分子生物学方法和菌落形态分析筛选鉴定缺陷型突变株。通过构建营养缺陷型菌株,为丝状真菌的转化提供了新的筛选标记。使学生系统地了解和掌握了基因定向敲除技术,提高了本科生综合实践能力和科研素养,取得了良好的教学成果。