青鳉抗病毒感染过程的负调控因子jun的鉴定
2021-11-09分类号:S943
【部门】华中农业大学水产学院/农业农村部淡水生物繁育重点实验室 集美大学水产学院/农业农村部东海海水健康养殖重点实验室
【摘要】Jun(Jun proto-oncogene, AP-1 transcription factor subunit)为组成转录因子AP-1的亚单位或亚家族成员,参与机体的免疫应答。为了进一步了解jun基因在鱼类抗病毒天然免疫方面的功能,以日本青鳉为研究对象,采用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术获得jun缺失的纯合子突变体品系,并对其在神经坏死病毒(nervous necrosis virus, NNV)感染过程中的特征展开研究。基因克隆结果显示,野生型日本青鳉的jun基因编码区全长921 bp,共编码306个氨基酸,含有N端的Jun超家族结构域和C端的bZIP超家族结构域,并在眼、脑、鳃、心脏、头肾、卵巢、精巢、肝脏、脾脏9个检测的组织中均有较高的表达。突变体jun~(-/-)在基因组减少了124 bp,而蛋白只剩下59个氨基酸的N端序列,缺失了Jun超家族结构域和bZIP结构域。病毒感染实验结果显示,jun~(-/-)仔鱼对于神经坏死病毒(nervous necrosis virus, NNV)的耐受能力相对野生型仔鱼有所提升;jun~(-/-)成鱼眼、脑、鳃和肌肉组织内的病毒相对含量都显著低于野生型。进一步的qRT-PCR结果显示,在jun~(-/-)青鳉中,fosl1的表达极显著下调,tbk1的表达降低,而irf3的表达极显著上调。以上结果表明,jun缺失能增强青鳉耐受NNV病毒的能力,jun基因可能是一个青鳉抗病毒信号通路的负调控因子。
【关键词】先天性免疫 jun 基因编辑 日本青鳉 抗病毒 负调控因子
【基金】国家自然科学基金项目(31771648,31672653);; 集美大学科研基金项目(ZQ2020003);; 国家重点基础研究发展计划项目(2013CB967700)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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