牛支原体VspX蛋白黏附特性解析
2020-06-30分类号：S852.62
【部门】华中农业大学动物医学院 农业微生物国家重点实验室 农业部反刍动物生物制品重点实验室 湖北省动物疫苗工程技术研究中心 动物生物药物教育部工程研究中心
【摘要】为进一步解析牛支原体(M.bovis)Vsp X蛋白的黏附特性,采用间接免疫荧光法检测Vsp X蛋白在M.bovis中的分布,然后通过黏附试验和抗体黏附抑制试验检测Vsp X蛋白的黏附性,最后采用ELISA方法进一步分析蛋白和突变株结合纤连蛋白(Fn)的特性.结果显示,M.bovis Vsp X蛋白位于M.bovis菌体表面;重组Vsp X蛋白(r Vsp X)能黏附到EBL细胞表面,且M.bovis Vsp X基因缺失突变株(M.bovisΔVsp X)体外黏附EBL细胞能力与M.bovis野生株(M.bovis WT)相比显著下降,两个结果说明r Vsp X蛋白具有黏附特性;并且抗r Vsp X蛋白单抗能抑制M.bovis黏附EBL细胞,进而证实r Vsp X蛋白黏附的特异性;此外,r Vsp X蛋白与Fn呈剂量依赖性结合,且M.bovisΔVsp X结合Fn能力与M.bovis WT相比显著下降,证明M.bovis Vsp X蛋白与Fn为特异性结合,且Fn分布在EBL细胞表面.以上结果表明,M.bovis Vsp X蛋白是一种具有Fn结合特性的黏附相关蛋白,能通过EBL细胞外基质成分Fn介导其黏附EBL细胞.
【关键词】牛支原体 Vsp X蛋白 黏附 纤连蛋白
【基金】国家重点研发计划项目(2018YFD0501802);; 国家现代农业(肉牛/牦牛)产业技术体系项目(CARS-37);; 全国农业科研杰出人才及其“牛病防治基础与技术创新团队”专项;; 河北省自然科学青年基金项目(C2018402137)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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