【摘要】建立肌型糖原磷酸化酶基因pygma和pygmb突变体斑马鱼疾病模型，对人类PYGM基因突变导致的糖原贮积症GSDⅤ(glycogen storage disease typeⅤ)的研究具有重要意义。利用CRISPR/Cas9技术成功地敲除了斑马鱼pygma和pygmb基因，分别获得pygma~((-11bp)-/-)和pygma~((+14bp)-/-)两种纯合突变体，以及pygmb~((+1bp)-/-)和pygmb~((-2bp)-/-)两种纯合突变体。过碘酸希夫糖原染色(periodic acidSchiff stain)实验显示pygma~(-/-)和pygmb~(-/-)纯合突变体心脏和肌肉组织出现明显的糖原累积。对野生型斑马鱼15个早期发育时间点以及12个成鱼组织中pygma和pygmb基因表达分析显示，pygma和pygmb早期发育阶段表达模式相似，从24hpf到125hpf，两基因表达量总体呈上升趋势；且pygmb的上升幅度大于pygma的上升幅度。在检测的12个组织中，pygma和pygmb只在少数几个组织中有明显表达。pygma在肌肉组织中表达最高，其次为心脏和皮肤组织；pygmb在心脏、脑、眼睛3个组织中高表达，在肌肉组织中也有表达，但表达量相对较低。斑马鱼pygma~(-/-)和pygmb~(-/-)突变体具有GSDⅤ病肌肉糖原累积的典型特征，该疾病模型的建立，为进一步研究糖原贮积症的发病进程、详细机制和药物筛选等治疗策略提供基础。