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坛紫菜有丝分裂阻滞缺陷蛋白2基因(Ph-mad2)的克隆及其在单性生殖过程中的表达

2020-06-10分类号:S917.3

【作者】钟晨辉  宦忠艳  唐隆晨  陆振  林琪  严兴洪  
【部门】上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室  福建省水产研究所福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室  
【摘要】为探究坛紫菜雌配子体单性生殖过程的细胞二倍化机制。本研究基于坛紫菜雌性配子体的转录组信息,克隆和分析了坛紫菜的有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(PhMAD2)基因(Ph-mad2),同时对其在坛紫菜单性生殖发生过程中处于不同发育时期的细胞中的表达特征进行了初步研究。结果显示,坛紫菜Ph-mad2基因的cDNA的完整开放阅读框为672 bp,编码223个氨基酸,分子量为23.8 ku。从氨基酸序列比对结果可知,坛紫菜PhMAD2蛋白中所具有的典型的HORMA结构域和保守的丝氨酸和苏氨酸磷酸化位点,均与团藻和莱茵衣藻MAD2蛋白相同。系统发育分析表明,坛紫菜与藻状菌纲的异丝水霉和寄生水霉的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR检测显示,与可进行正常有丝分裂的营养细胞相比,在坛紫菜单性生殖过程中发生细胞二倍化的生殖细胞和单性孢子时期,Ph-mad2基因的表达量显著下降;但是,在随后可进行正常有丝分裂的单性孢子萌发体细胞和处于营养生长期的单性孢子体细胞中则表达上调。这一结果暗示Ph-mad2基因的表达下调可能阻碍了坛紫菜单性生殖初期单倍体细胞进行有丝分裂时纺锤体组装检验点的形成,在一定程度上致使它们发生了染色体加倍。本研究结果为进一步阐明坛紫菜单性生殖过程的染色体自然加倍机制提供了一定的基础。
【关键词】坛紫菜  单性生殖  有丝分裂阻滞缺陷蛋白2基因  基因克隆  表达
【基金】国家重点研发计划“蓝色粮仓科技创新”重点专项(2018YFD0900606);; 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-50);; 江苏省科技计划项目(BE2018335);; 浙江省农业(水产)新品种选育重大科技专项(2016C02055-6);; 福建省科技计划项目(2019R1013-8)
【所属期刊栏目】水产学报
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