标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

谷氨酰胺对呕吐毒素诱导IPEC-J2细胞凋亡和炎症的影响

2020-06-03分类号:S852.2

【作者】李若楠  康瑞芬  沈丹  戴鹏远  唐倩  李春梅  
【部门】南京农业大学动物科技学院  
【摘要】[目的]本试验以猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)为模型,探讨谷氨酰胺(Gln)对呕吐毒素(DON)诱导的IPEC-J2细胞凋亡和炎症的影响。[方法]通过MTT方法测定细胞活力来选择适宜的Gln浓度,以不添加Gln和DON的细胞为空白对照组,试验组分别为0.75 mmol·L~(-1) Gln组,2.0 μg·mL~(-1) DON组和2.0 μg·mL~(-1) DON+0.75 mmol·L~(-1) Gln组,处理24 h后测定各组细胞凋亡率、活性氧自由基(ROS)及细胞凋亡和炎症相关基因和蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,DON处理24 h显著升高细胞的凋亡比例和ROS含量(ROS荧光密度/细胞总数)(P<0.01);与DON组相比,DON+Gln组显著降低细胞的凋亡比例和ROS含量(P<0.01)。与对照组相比,DON组上调了IPEC-J2细胞白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL–6)、环氧合酶2(COX–2)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)炎症相关基因和Caspase-3及Caspase-8凋亡相关基因的表达水平;与DON组相比,DON+Gln组下调了IPEC-J2细胞IL-1β、COX–2、Caspase-3、Caspase-8、BAK和Bcl-2基因的表达水平。蛋白免疫荧光结果显示,与对照组相比,DON组上调IPEC-J2细胞Caspase-3,核转录因子κB(NF-κB)和磷酸化核转录因子κB(phospho-NF-κB)蛋白的表达,而添加Gln后(DON+Gln组)下调了相关蛋白的表达。[结论]Gln通过清除DON诱导的IPEC-J2细胞中过量的ROS和调节炎症和凋亡相关基因及蛋白的表达量来缓解由DON引起的肠道上皮细胞损伤。
【关键词】谷氨酰胺  呕吐毒素  猪空肠上皮细胞  炎症  凋亡
【基金】国家自然科学基金项目(31772648)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
文献传递