【摘要】白细胞介素17 (Interleukin-17, IL-17)在炎症和宿主防御中起重要作用。为了解鲤(Cyprinus carpio) IL-17N基因的功能，本实验使用同源搜索和基因克隆的方法在鲤基因组挖掘鉴定到两个IL-17N基因(CcIL-17Na和CcIL-17Nb)，均由TOP3B基因内含子2的互补序列编码。共线性比较显示，除了东方红鳍鲀(Takifugu rubripes)外，在其他已研究的鱼类中，与该基因相邻的均为SDF2L和PPM1F基因。两个CcIL-17Ns都有3个外显子，编码136个氨基酸，两者相似性高达为97.1%，CcIL-17Na、CcIL-17Nb和其他硬骨鱼类的IL-17N相似性分别为65.3%～97.1%、64.7%～96.3%，和鲤IL-17家族其他成员的相似性分别为32.9%～51.4%、31.4%～50.7%。鱼类IL-17家族系统树显示7个成员形成6支，其中IL-17A/F1和IL-17A/F3组成一支，其余6个成员单独成支，鲤IL-17N先与鲤科鱼类以94% 置信值聚在一起，然后与鲑鳟鱼类、鳉、东方红鳍鲀和尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)等以85%的置信值聚在一起，再与雀鳝(Lepisosteus oculatus)和腔棘鱼(Coelacanth)的IL-17N以95% 置信值聚为一支。实时定量PCR结果显示CcIL-17Ns在受精后0.5 h和12 h的表达量极显著高于受精后25 h、35 h、60 h、120 h及仔鱼阶段的表达量(P<0.01)；CcIL-17Ns在鲤夏花和成鱼脑中的表达量均最高，显著(P<0.05)或极显著(P0.05)。构建原核重组表达载体pMAL-c2X-17N，在大肠杆菌Transetta (DE3)中进行原核表达，使用镍柱纯化获得可溶的IL-17N重组蛋白(MBP-17N)。使用0.1 ng/mL、1 ng/mL、10 ng/mL和100 ng/mL的MBP-17N孵育鲤肾组织8 h，结果显示，不同浓度的MBP-17N均使IL-1β和NF-κB显著上调(P<0.05)。本实验通过分析鲤IL-17Ns的系统发育、测定该基因的时空表达特征，发现嗜水气单胞菌感染后各组织CcIL-17Ns表达上调、原核表达蛋白能引起炎症因子的表达，从而证实了鲤IL-17N参与炎症反应。