LncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞睾酮分泌的影响及其靶基因鉴定
2020-04-30分类号:S826
【部门】南京农业大学羊业科学研究所
【摘要】[目的]探究lncRNA-NAS对湖羊睾丸间质细胞(LCs)睾酮分泌的影响。[方法]首先利用qRT-PCR对湖羊lncRNA-NAS进行组织表达谱分析;然后利用ELISA、Western blot、CCK-8、qRT-PCR等技术分析其干扰lncRNA-NAS对睾丸间质细胞睾酮分泌、细胞增殖和凋亡的影响;并在前期测序结果上对lncRNA-NAS可能作用的靶基因进行分析。[结果]lncRNA-NAS在湖羊心脏、肝、脾、肾、空肠、睾丸组织中均有表达,但其在睾丸中的表达量显著高于其它组织(P0.05);相比对照组,干扰lncRNA-NAS后,睾丸间质细胞中睾酮分泌水平显著升高(P<0.05),睾酮分泌相关基因和蛋白表达量显著升高(P<0.05),细胞增殖活力增强(P<0.05);通过分析lncRNA-NAS潜在的9个靶基因,其中有2个为未知基因,后续针对7个已知基因进行研究,当lncRNA-NAS干扰后,发现只有生殖细胞发育相关基因Nanos3表达水平发生变化,表现为显著升高(P<0.05),结果提示其可能为lncRNA-NAS作用的靶基因Nanos3。[结论]lncRNA-NAS可能通过调控靶基因Nanos3影响湖羊睾丸间质细胞睾酮的分泌。
【关键词】湖羊 lncRNA-NAS 睾丸间质细胞 睾酮 Nanos3
【基金】国家自然科学基金面上项目(31872359)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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