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大豆异黄酮相关基因GmUGT73克隆及功能初步鉴定

2020-04-28分类号:S565.1

【作者】王俊  董海冉  常宏  王伟  包冬芳  赵孝岳  赵雪  韩英鹏  
【部门】东北农业大学  
【摘要】UGT是一类糖基转移酶,它对黄酮类化合物进行糖基化修饰,合成异黄酮糖苷,在异黄酮的合成、转运、存储等方面发挥了重要的作用。为了探索UGT功能,通过RT-PCR方法从中豆27中克隆获得GmUGT73基因的CDS全长序列。利用ProtParam tool等在线软件对GmUGT73蛋白序列及理化性质进行分析,预测结果表明,GmUGT73基因的编码区编码464个氨基酸,分子质量为51.186 5 ku,理论等电点(pI)为6.27,总原子数为7 176,分子式为C_(2281)H_(3580)N_(608)O_(685)S_(22)。GmUGT73蛋白总正电和负电残基数分别为37和41,蛋白的不稳定系数为36.93,表明该蛋白较稳定,蛋白的脂溶指数为86.19,GRAVY值为-0.111,说明该蛋白为亲水性蛋白。将线性植物表达载体与目的片段进行连接,成功构建pCambia3300-GmUGT73植物表达载体,通过发根农杆菌介导法转化大豆毛状根并获得转基因阳性根系,利用高效液相色谱(HPLC)对根系进行异黄酮含量测定,结果表明,转基因阳性根中异黄酮含量与对照相比极显著提高(P<0.01),说明该基因可能具有促进合成大豆异黄酮的功能。
【关键词】大豆  异黄酮类  糖基转移酶  候选基因  农杆菌转化  克隆  基因功能鉴定
【基金】国家科技重大专项和重点研发项目(课题)省级资助项目(GX17B002);; 黑龙江省杰出青年基金项目(JC2018007);; 黑龙江省博士后项目(LBH-Q17015);; 国家重点研发计划项目(2016YFD0100304);; 国家自然基金面上项目(31671717)
【所属期刊栏目】华北农学报
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