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缢蛏(Sinonovacula constricta)2-CRD型半乳糖凝集素(Galectin)基因的克隆和表达分析

2020-04-27分类号:S917.4

【作者】徐晓荣  施鹏  徐继林  廖凯  冉照收  严小军  
【部门】宁波大学海洋学院  
【摘要】本研究利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得了缢蛏半乳糖凝集素基因(ScGL)。ScGL全长为1 282 bp,5′非编码区35 bp,3′非编码区329 bp,开放阅读框918 bp,编码305个氨基酸。氨基酸序列分析显示ScGL无跨膜结构域;与已报道的缢蛏半乳糖凝集素含1个糖识别结构域(CRD)不同,ScGL具有2个CRD。相似性分析显示,ScGL与其他软体动物的半乳糖凝集素具有较高的相似性,与菲律宾蛤仔相似性最高,达65%;与已报道的2个缢蛏半乳糖凝集素相似性分别为39.74%和44.76%。系统进化上ScGL与菲律宾蛤仔半乳糖凝集素聚为一支。重组表达发现ScGL在包涵体表达,分子量约34.4 ku。荧光定量PCR分析显示,ScGL在缢蛏鳃、肠、唇瓣、外套膜、出水管、入水管、足和内脏团中均表达;其中肠、内脏团、唇瓣和足中表达量较高,出水管和入水管中表达量最低。消化腺ScGL表达量分别在金黄色葡萄球菌感染后3和48 h显著高于对照组;鳃ScGL表达量分别在鳗弧菌和金黄色葡萄球菌感染后6和48 h显著高于对照组,说明ScGL参与了病原诱导的缢蛏免疫应答。本研究为深入探索ScGL在缢蛏免疫中的作用奠定基础。
【关键词】缢蛏  半乳糖凝集素  免疫  表达特征  原核表达
【基金】浙江省科技重大专项(2019C02057);; 宁波市科技重大专项(2019B10006);; 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-49)
【所属期刊栏目】水产学报
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