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玉米ZmMYB59基因启动子的克隆及功能分析

2020-04-15分类号:S513

【作者】叶浩田  郑美霞  孙彩霞  赵光武  
【部门】浙江农林大学农业与食品科学学院/浙江省农产品品质改良技术研究重点实验室  
【摘要】为研究ZmMYB59基因启动子的表达模式,以玉米自交系‘B73’幼苗基因组DNA为模板,克隆ZmMYB59基因2个启动子片段分别命名为MYB59-P-1、MYB59-P-2,构建GUS植物表达载体pCXGUS-MYB-1K,pCXGUS-MYB-2K,并通过农杆菌介导法转化水稻‘日本晴’获得GUS植物表达载体转基因植株。通过PlantCARE软件进行生物信息学分析,发现ZmMYB59基因启动子中具有ABRE和CCGTCC-box等重要的顺式作用元件。GUS染色结果显示:1)pCXGUS-MYB-1K的种子没有着色,表明其未驱动GUS在种子中表达,pCXGUS-MYB-2K的种子胚乳边缘着色,表明其驱动的GUS在种子胚乳边缘表达;2)种子萌发期pCXGUSMYB-1K只有芽尖着色,表明其仅驱动GUS在芽尖表达,pCXGUS-MYB-2K芽尖和根均着色,芽尖着色较深,根维管束细胞少量着色,表明其驱动的GUS主要在芽尖表达,而在根部维管束组织中表达较弱;3)苗期pCXGUSMYB-1K,pCXGUS-MYB-2K植株的根、茎、叶均能着色,但后者着色较深,表明ZmMYB59基因的启动子可能是组成型启动子,同时也说明MYB59-P-1是启动子发挥正常调控功能所必须的,但启动能力不强,推测MYB59-P-2中可能存在增强启动子表达的顺式作用元件。
【关键词】玉米  启动子  GUS染色  转化  元件  功能分析
【基金】国家重点研发计划“七大农作物育种”重点专项(2018YFD0100900);; 国家自然科学基金(31371712);; 浙江省自然科学基金(LY18C130001);; 浙江省农业(粮食)新品种选育重大科技专项(2016C02050-9-5);; 浙江农林大学大学生科研训练项目(KX20180015)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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