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白藜芦醇对乳房链球菌感染引起乳腺细胞氧化应激的影响及机制

2020-03-18分类号:S853.74

【作者】周艺琳  王正磊  许媛媛  韩先干  PHOUTHAPANE Vanhnaseng  苗晋锋  
【部门】南京农业大学动物医学院  中国农业科学院上海兽医研究所  老挝科技部生态与生物技术研究所  
【摘要】[目的]本试验旨在探讨白藜芦醇对乳房链球菌感染引起乳腺细胞氧化应激的影响及机制。[方法]先用15 μmol·L~(-1)白藜芦醇(resveratrol)处理小鼠乳腺上皮细胞(EpH_(4)-Ev)4 h,再加入乳房链球菌(MOI = 10)共孵育3 h,收集样品;通过生化试剂盒(硝酸还原酶法、比色法、微量法等)、流式细胞术、显微镜观察、Western blot、RT-qPCR等方法检测相关指标的变化。[结果] S.uberis感染可显著提高EpH_(4)-Ev细胞活性氧(ROS)水平和一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、乳酸脱氢酶(LDH)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低总抗氧化能力(T-AOC)水平。白藜芦醇预处理后可显著降低ROS水平、NO含量、iNOS、LDH、NAGase活性,显著提高T-AOC水平,进一步提升SOD活性。在分子水平上,S.uberis感染显著提高EpH_(4)-Ev细胞血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)mRNA与核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达水平,而白藜芦醇预处理对其有进一步提升作用。显微镜观察发现白藜芦醇预处理可以明显改善由S.uberis感染引起的小鼠乳腺上皮细胞发生皱缩。[结论]白藜芦醇可以有效缓解乳房链球菌感染引起乳腺细胞的氧化应激,这可能与白藜芦醇激活Nrf2蛋白并促进其下游抗氧化基因表达相关。
【关键词】小鼠乳腺上皮细胞  白藜芦醇  乳房链球菌  氧化应激  Nrf2
【基金】国家重点研发计划项目(2017YFD0501000,2018YFE0102200)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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