毛喉素诱导猪卵泡颗粒细胞体外分化机制的研究
2020-03-17分类号:S828
【部门】南京农业大学动物科技学院/家畜繁殖研究室 南京农业大学动物科学类国家级实验教学示范中心
【摘要】[目的]本试验旨在研究毛喉素(FSK)对体外培养的猪卵泡颗粒细胞分化的作用及其机制。[方法]体外分离培养猪原代卵泡颗粒细胞,预培养24 h。应用FSK(10 nmol·L~(-1))处理细胞48 h,检测细胞形态、脂滴积聚、标记基因和周期相关基因表达;处理96 h检测孕酮(P_(4))水平及类固醇合成相关蛋白的表达。[结果]与对照组相比,FSK改变了细胞形态,增大了细胞直径,并使细胞内脂滴含量增加(P < 0.01);FSK降低了细胞的增殖活性和增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA的表达水平(P < 0.01);FSK降低了颗粒细胞标记基因促卵泡素受体(FSHR)mRNA的表达水平,提高了黄体细胞标记基因前列腺素受体(PTGFR)和促黄体素受体(LHCGR)mRNA的表达水平(P < 0.01);FSK促进了P_(4)分泌,提高了类固醇合成相关蛋白StAR、P450scc和3β-HSD的表达水平(P < 0.01);从细胞周期看,FSK降低了细胞周期素B1(CCNB1)、细胞周期素D1(CCND1)和细胞周期蛋白依赖性激酶1 (CDK1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)基因的表达(P < 0.01),而使细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A/B(P21~(cip1)/P27~(kip1))基因表达上调(P < 0.01),并将细胞周期阻滞在G0/G1期。[结论]FSK能够通过抑制细胞增殖、增强脂滴积聚和孕酮合成代谢、退出细胞周期来促进颗粒细胞向黄体细胞转化。
【关键词】毛喉素 猪 颗粒细胞 分化 细胞周期
【基金】国家自然科学基金项目(31501956)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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