三角帆蚌中WNT4基因克隆及表达分析
2020-03-05分类号:S917.4
【部门】上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室 上海海洋大学上海市水产养殖工程技术研究中心 上海海洋大学水产科学国家实验教学示范中心
【摘要】为进一步了解WNT4在三角帆蚌性别决定过程中的作用,通过RACE(Rapid-amplification of cDNA ends)技术克隆获得了三角帆蚌WNT4基因的全长cDNA,共1560 bp,其中5’-UTR 396 bp、3’-UTR 24 bp,开放阅读框(ORF)为1140 bp,可以编码379个氨基酸,且该序列含有Wnt家族特有结构域。对WNT4的氨基酸序列进行同源性分析后,发现该基因在物种间的进化关系和结构功能具保守性。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析发现WNT4基因在三角帆蚌雌雄多个组织中(外套膜、闭壳肌、鳃、性腺、斧足和肝)均有表达,表明其参与了多样的生物学过程,在腮、斧足、肝中表达量较高,在性腺、闭壳肌、斧足中雌雄间有显著性差异,且雌性三角帆蚌的性腺、闭壳肌表达量显著高于雄性。原位杂交结果显示,WNT4在雌性三角帆蚌的卵母细胞上有明显的杂交信号,推测WNT4基因与性别决定相关。
【关键词】三角帆蚌 性别决定 WNT4 qRT-PCR 原位杂交
【基金】国家自然科学基金(31772835);; 国家重点研发计划“蓝色粮仓科技创新”专项(2018YFD0901406)
【所属期刊栏目】上海海洋大学学报
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