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菊芋果聚糖合成酶基因1-SST启动子克隆与活性研究

2020-02-28分类号:S632.9

【作者】孙雪梅  宗渊  杨世鹏  王丽慧  刘宝龙  张怀刚  
【部门】中国科学院西北高原生物研究所  青海省作物分子育种重点实验室  中国科学院大学  青海省蔬菜遗传与生理重点实验室  青海大学  
【摘要】【目的】本文分离了菊芋蔗糖:蔗糖-1-果糖基转移酶(1-SST)基因的启动子并验证其功能。【方法】通过Tail-PCR方法克隆到菊芋1-SST基因起始密码子上游约1816 bp的序列(SSTP),并通过PLANTCARE对SSTP序列进行了功能预测。【结果】SSTP序列中共检测到140个顺式作用元件,除启动子所具有的44个TATA-box和31个CAAT-box等基本元件之外,还有65个参与1-SST基因表达调控的顺式作用元件,其中23个顺式作用元件可预测其功能:参与光调控过程的调控元件有13个,参与脱落酸、厌氧过程、低温胁迫的调控元件各2个,参与水杨酸、抗逆反应、分生组织表达和胚乳表达的调控元件各1个。分别用SSTP、1/2SSTP和1/4SSTP的序列替换pCAMBIA1301载体的CaMV 35S启动子后,在烟草叶片中进行瞬时表达并进行GUS染色,结果表明不同长度的SSTP序列均具有驱动GUS基因表达的启动子活性,且与CaMV35S启动子活性相当。【结论】据此推测1-SST基因的启动子核心区域在起始密码子上游400 bp以内。
【关键词】菊芋  果聚糖  1-SST  启动子  克隆  活性  顺式作用元件
【基金】国家自然科学基金项目(31460523);; 青海省应用基础研究项目(2016-ZJ-751);; 青海省创新服务平台项目(2018-ZJ-T08);; 青海省创新平台建设专项(2017-ZJ-Y18)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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