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鳜脑神经元的原代培养与鉴定

2020-01-15分类号:S917.4

【作者】石林杰  梁旭方  何珊  彭建  
【部门】华中农业大学水产学院华中农业大学鳜鱼研究中心  农业农村部鳜鱼育种创新基地农业农村部淡水生物繁育重点实验室  
【摘要】目前鱼类神经细胞模型极少,物种间的差异性使鳜在细胞水平上的研究具有极大的局限性,为建立一种简单易行的鳜脑神经元细胞模型进一步研究鳜神经系统,本实验取3月龄鳜,联合胶原酶消化法和机械吹打法分离出鳜脑细胞,用含20%FBS的L15培养液制成细胞悬液接种在细胞培养瓶内,于28°C无CO_2培养箱中培养,3 d后更换培养基,待细胞贴壁长满瓶底后进行传代培养;采用Neu-N和β-tubulin免疫荧光细胞化学技术鉴定鳜脑细胞神经元纯度。结果显示,鳜脑细胞分离培养2 d后贴壁状态较好,随着时间延长,贴壁细胞增多,细胞突起相互连接,培养5 d后神经元胞体丰满,细胞数量明显增多,突起相互间形成了明显的神经网络。经Neu-N和β-tubulin免疫荧光细胞化学技术鉴定鳜脑神经元细胞纯度可达95%以上。研究表明,该鳜脑细胞的分离培养方法简单易行,且可获得高纯度的鳜脑神经元细胞。
【关键词】鳜  脑  神经元细胞  原代培养
【基金】国家自然科学基金(31772822);; 国家自然科学青年基金(31602131)~~
【所属期刊栏目】水产学报
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