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谷氨酰胺对GF-1细胞中C-Myc蛋白的表达与神经坏死病毒复制的影响

2020-01-07分类号:S943

【作者】沈海洋  卢志杰  秦真东  赵丽娟  李亚男  刘春  杨光  叶成凯  易敢峰  林蠡  
【部门】华南师范大学生命科学学院广东省水产健康安全养殖重点实验室  仲恺农业工程学院动物科技学院广东省水环境与水产品安全工程技术研究中心广州市水产病害与水禽养殖重点实验室  
【摘要】为探讨C-Myc表达、谷氨酰胺代谢和神经坏死病毒复制三者之间的关系,本研究首先克隆了斜带石斑鱼鳍条细胞(GF-1)中的C-Myc基因(GF-1-C-Myc),结果显示GF-1-C-Myc 基因cDNA全长814 bp,开放阅读框(ORF)有285 bp,编码95个氨基酸(aa),有亮氨酸拉链结构域与螺旋-环-螺旋(HLH)结构域。表达和纯化了GF-1-C-Myc 蛋白,并制备其多克隆抗体。采用实时定量PCR技术(qRT-PCR) 与免疫印迹法(WB)检测了GF-1-C-Myc 基因的表达和神经坏死病毒的复制。结果显示,缺乏谷氨酰胺会同时抑制GF-1-C-Myc基因的表达和NNV的复制,添加谷氨酰胺可同时促进GF-1-C-Myc的表达和NNV的复制;此外,NNV感染可上调GF-1-C-Myc 基因的表达,并显著消耗GF-1 细胞培养液中的谷氨酰胺。研究表明,GF-1-C-Myc基因可调控宿主谷氨酰胺代谢,从而有利于神经坏死病毒的复制。本结果为防控神经坏死病毒的感染提供了参考。
【关键词】斜带石斑鱼  C-Myc基因  GF-1细胞  神经坏死病毒  感染  谷氨酰胺
【基金】国家自然科学基金(31872606);; 广东省海洋与渔业局基金(GDME-2018C006,D21822202);; 中国—东盟海上合作基金(CAMC-2018F);; 广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金(2019KJ141)
【所属期刊栏目】水产学报
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