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利用mini-Tn10转座子文库筛选鳗弧菌M3表型发生变化的基因

2019-12-16分类号:S917.1

【作者】李倩  李贵阳  李杰  莫照兰  
【部门】上海海洋大学水产与生命学院  中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室  
【摘要】鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的运动能力、菌膜形成能力、胞外蛋白酶产生能力等表型特征的变化与细菌的致病性相关。为了寻找影响鳗弧菌表型变化的基因,本研究使用转座子mini-Tn10 (pLOF/Kana)构建了鳗弧菌M3突变株文库,筛选影响表型变化的菌株及相关基因,证明了这些表型变化的突变子与毒力存在一定的相关性。对M3突变文库的1152突变子进行筛选,获得泳动能力改变的突变子1个(编号为6G_1),酪蛋白酶活性发生改变的突变子3个(编号为5A_11、7B_12和7E_12),明胶酶活性发生改变的突变子1个(编号为7H_1),以及菌膜形成能力发生显著变化的突变子3个(编号为5E_2、6A_2和6E_12)。对转座子插入位点进一步分析显示,一个磷酸二酯酶相关基因突变引起泳动能力增强(P<0.05),leuD、rseB和thiQ突变引起酪蛋白酶活性显著减弱(P<0.05),potD突变引起明胶蛋白酶活性显著减弱(P<0.05),leuO、ilvH和grpB的突变引起菌膜形成能力明显减弱(P
【关键词】鳗弧菌  mini-Tn10转座子  突变文库  表型  基因
【基金】国家重点研发计划(2018YFC0311300);; 国家自然科学基金–山东省人民政府联合基金(U1706205);; 中国水产科学研究院黄海水产研究所基本科研业务费(20603022017008);; 鳌山科技创新计划(2015ASKJ02)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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