标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除团头鲂socs1重复基因

2019-12-03分类号:S917.4

【作者】赵心愉  刘娟  邹曙明  
【部门】上海海洋大学农业部团头鲂遗传育种中心农业农村部淡水水产种质资源重点实验室水产科学国家级实验教学示范中心  
【摘要】细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS1)是一种重要的负反馈调节因子,广泛参与调控多种细胞因子介导的信号通路,在免疫系统的调节和生物体的生长发育过程中都发挥着至关重要的作用。本实验以已获得的团头鲂socs1a和socs1b基因为编辑对象,在线分析筛选出合适的靶点合成gRNA(guide RNA),然后对1~2细胞期的团头鲂胚胎进行gRNA和Cas9蛋白的混合注射。通过荧光定量PCR在转录水平鉴定socs1a和socs1b的表达和测序在DNA水平鉴定基因的序列突变,成功建立了多种socs1的突变品系。与同期野生型(WT)相比,SOCS1a~(+/-)和SOCS1b~(+/-)团头鲂生长性能增强、体质量显著增加,同时炎症因子TNF-α和IL-6表达量显著增加,而IL-1β表达无明显变化。注射嗜水气单胞菌后,与野生型不同的是,IL-6和TNF-α在SOCS1a~(+/-)和SOCS1b~(+/-)团头鲂的肝脏中的表达均有持续显著上升。本实验通过CRISPR/Cas9系统成功敲除了团头鲂socs1a和socs1b基因,为进一步探讨socs1基因的作用提供了一定的研究基础。同时,也为以养殖鱼类为对象,合理选用CRISPR/Cas9基因编辑技术提供了依据和借鉴。
【关键词】团头鲂  CRISPR/Cas9  SOCS1  基因编辑
【基金】国家自然科学基金(31572220,2012BAD26B00);; 上海高校知识服务平台(ZF1206)
【所属期刊栏目】水产学报
文献传递