茉莉花原生质体瞬时表达体系的建立及应用
2019-11-18分类号：S685.16
【部门】福建农林大学生命科学学院福建省植物功能生物学与绿色农业重点实验室 福建农林大学园艺学院
【摘要】探索了茉莉花原生质体瞬时转化的方法,发现室外种植盛开的茉莉花花瓣更适于分离有活力的原生质体,在15 g·L~(-1)纤维素酶、8 g·L~(-1)果胶酶和4 g·L~(-1)离析酶共同作用下,于25℃黑暗条件酶解5 h,所获得的原生质体产量和活性最佳.当细胞浓度为4×10~5个·mL~(-1),外源质粒DNA含量为75μg·mL~(-1)原生质体时,在200 g·L~(-1)的PEG-4000介导转化2～10 min,可获得较高的转化效率.利用本研究建立的茉莉花原生质体瞬时转化体系成功鉴定了3个茉莉花来源蛋白的亚细胞定位,为高通量开展茉莉花关键基因的功能研究提供了技术支持.
【关键词】茉莉花 原生质体 亚细胞定位
【基金】福州市校(院所)科技合作项目(2017-G-84);; 园艺学院国家级创新训练项目(201810389035);; 福建省自然科学基金(2015N0019);; 国家自然科学基金(31701862);; 福建农林大学“校杰出青年科研人才”计划项目(xjq201717)
【所属期刊栏目】福建农林大学学报(自然科学版)
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