达氏鲟dmc1基因的克隆及在精子生成中的表达分析
2019-07-15分类号:S917.4
【部门】华中农业大学水产学院 中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护重点实验室 中国科学院水生生物研究所
【摘要】DNA减数分裂重组酶1基因(disrupted meiotic cDNA,dmc1)是一个在减数分裂时期特异表达的基因,为减数分裂同源染色体配对所必需。为研究dmc1基因在达氏鲟(Acipenser dabryanus)不同组织的表达特征,从达氏鲟性腺转录组数据库搜索得到该基因并设计引物,克隆获得达氏鲟dmc1的编码区序列,其中开放阅读框(ORF)为1 029 bp,编码342个氨基酸。运用生物信息学方法分析达氏鲟dmc1基因编码的蛋白序列和系统进化关系,推测达氏鲟Dmc1蛋白的分子量为82.696 kDa,理论等电点(PI)为5.04;多重序列比对发现,Dmc1氨氮酸序列在进化中可能比较保守。系统进化分析显示,AdDmc1属于RecA家族Dmc1蛋白分支,且与四足动物类聚为一支。RT-PCR结果表明,dmc1基因在精巢和卵巢中特异表达。结合组织学结果通过实时荧光定量PCR研究dmc1基因在精子生成过程中的表达特征发现,dmc1基因在0~Ⅰ期精巢中不表达;在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期精巢中,其表达量逐渐升高并在Ⅳ期精巢中达到最高;在Ⅴ期精巢中,其表达量显著性下降(P<0.05),因此推断达氏鲟dmc1基因可能是减数分裂时期特异表达的基因,研究结果可为后续达氏鲟初级和次级精母细胞的鉴定奠定基础。
【关键词】达氏鲟 dmc1 减数分裂 性腺发育 表达分析
【基金】中央级公益性科研院所基本科研业务费-水产生物生殖调控相关机制及技术研究-达氏鲟精原干细胞体外增殖与冷冻保存(2015B02YQ01);; 中国水产科学研究院基本科研业务费(2018JBF10);; 国家自然科学基金面上项目(No.31772854);; 中央公益性基本科研业务费项目(2017HY-ZD0405);; 973项目-中华鲟性腺发育关键营养物质体内转化的生理基础(2015CB150702)
【所属期刊栏目】海洋渔业
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