苏丹鱼甘露糖受体的基因克隆表达和免疫特性
2019-06-03分类号:S917.4
【部门】广东省水环境与水产品安全工程技术研究中心广州市水产病害与水禽养殖重点实验室仲恺农业工程学院动物科技学院 佛山市南海区标记鱼苗场
【摘要】为了解苏丹鱼MR(Lh MR)的结构特点及其在抗感染免疫反应中的作用,本研究克隆并分析了LhMR基因,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测了LhMR在正常及柱状黄杆菌感染苏丹鱼组织中的表达。结果显示,LhMR开放阅读框4 296 bp,编码1 431个氨基酸(aa)。LhMR的氨基酸序列和分子结构与其他物种高度相似,胞外1个富含蓖麻类β型三叶草的结构域(RICIN)、1个纤连蛋白Ⅱ型结构域(FNⅡ)、8个串连的C型凝集素样结构域(CLECTs)、1个跨膜区和1个胞内区。通过qRT-PCR检测显示,LhMR在脾脏、体肾、心脏、脑、皮肤、肌肉、鳃、肝脏、后肠、前肠和中肠11种组织中均有表达,其中脾脏中表达量最高;经柱状黄杆菌感染苏丹鱼后,脾脏、肠、体肾和鳃中LhMR基因的相对表达量显著升高。通过免疫组织化学(IHC)检测发现,在脾脏、肾脏和鳃中的LhMR蛋白表达水平提高。通过苏木精-伊红染色病理组织切片表明,在体肾、肠、肝脏和鳃中均有不同程度的病变。体肾的肾小管有大量的血细胞浸润,上皮细胞发生坏死;肠壁变薄,组织大量弥散坏死;肝脏组织中有多个空泡;鳃小片肿胀、混乱、坏死和脱落。研究表明,LhMR在苏丹鱼感染柱状黄杆菌免疫反应中发挥重要作用,为苏丹鱼柱形病的防控提供新的参考。
【关键词】苏丹鱼 柱状黄杆菌 甘露糖受体 克隆 基因表达
【基金】中国-东盟海上合作基金;; 国家自然科学基金(31872606,31572657,U1701233);; 广东省海洋与渔业局基金(GDME-2018C006,D21822202,A201512C003,2015-115);; 广东省教育厅基金(KA170500G,TK222001G,KA18058B3,KA1819604)~~
【所属期刊栏目】水产学报
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