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苹果类泛素蛋白MdRAD23C2基因的分离及功能鉴定

2019-04-22分类号:Q78;S661.1

【作者】豆芳芳  龚小庆  邹养军  
【部门】西北农林科技大学园艺学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室  广元市农业科学研究院  
【摘要】【目的】研究苹果类泛素蛋白RAD23基因(MdRAD23C2)的功能,为抗旱苹果新品种的培育奠定基础。【方法】以秦冠苹果(Malus domestica cv.‘Qinguan’)为材料,克隆MdRAD23C2基因,对其进行生物信息学和定位分析,通过实时定量PCR分析其在不同逆境胁迫下(干旱、盐、碱和ABA)的表达模式。构建过表达载体转化农杆菌,采用叶盘法转化烟草,选取相应的转基因烟草株系,分析干旱胁迫下转基因烟草的相对电导率和丙二醛、叶绿素、过氧化氢(H_2O_2)、超氧阴离子■含量以及二氨基联苯胺(DAB)、氮蓝四唑(NBT)染色情况,探讨MdRAD23C2过表达对转基因烟草抗旱能力的影响。【结果】苹果MdRAD23C2基因编码序列长1 146 bp,编码381个氨基酸,其定位于细胞核和细胞膜中,可响应干旱、盐和碱等逆境胁迫。干旱处理2周,野生型烟草株系萎蔫程度明显,且DAB和NBT染色加深,相对电导率、丙二醛、H_2O_2和■含量均极显著高于转基因型烟草,而叶绿素含量极显著低于转基因型烟草,说明过量表达MdRAD23C2的烟草株系对干旱胁迫的耐受性明显增强。【结论】分离克隆了苹果MdRAD23C2基因,该基因可提高转基因植物对干旱胁迫的耐受性。
【关键词】类泛素蛋白  秦冠苹果  转基因烟草  干旱胁迫  抗旱育种
【基金】国家自然科学基金项目(31601737);; 中央高校基本科研业务费项目(2452015019);; 陕西省博士后科学基项目(2016-BSHED-ZZ118);; 国家苹果产业技术体系项目(CARS-27);; 陕西科技攻关项目“渭北旱地苹果园深层土壤干燥化形成机理与调控”(2016NY-070)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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