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基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统构建ε–聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体

2019-04-22分类号:Q78

【作者】周奕阳  李鹏  谭之磊  邓子新  贾士儒  欧竑宇  
【部门】上海交通大学生命科学技术学院  江西省科学院微生物研究所  天津科技大学生物工程学院  
【摘要】鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。
【关键词】链霉菌  表达载体  Ⅱ型毒素–抗毒素系统  ε–聚赖氨酸合成酶  质粒稳定性
【基金】国家自然科学基釐项目(31371261)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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