基于核酸适配体的PCR法检测溶藻弧菌及其灭活菌
2019-03-15分类号:S941.4
【部门】鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心 福建省海洋渔业资源与生态环境重点实验室 集美大学水产学院 广东雅琪生物科技股份有限公司 厦门阳嘉环保科技有限公司
【摘要】溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)分布广,数量多,发病率高,是水产养殖中常见的条件致病菌,而对溶藻弧菌进行快速准确的识别鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体,因为具有较高的亲和特异性,在微生物的识别鉴定方面展现出了巨大的优势。本文利用核酸适配体和适配体筛选产物,通过结合、洗涤、加热分离、PCR扩增以及电泳检测等步骤,对溶藻弧菌进行了检测鉴定。结果表明,适配体和筛选产物都能对溶藻弧菌及其灭活菌进行较好的识别鉴定,适配体筛选产物对溶藻弧菌的检测下限为10~3cfu/mL,而对其灭活菌的检测下限为10~2cfu/mL,适配体对溶藻弧菌及其灭活菌的检测下限都可达到10 cfu/mL。该方法对溶藻弧菌有较好的亲和特异性,并能较好地区分溶藻弧菌与哈维氏弧菌等水产常见病原菌,在水产病害的检测中显示了较好的应用前景。
【关键词】核酸适配体 溶藻弧菌 PCR 灭活 检测
【基金】国家海洋经济发展区域示范项目(14PYY050SF03);; 福建省自然科学基金项目(2018J01455);; 鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心开放基金项目(RE201808);; 大学生创新创业训练计划项目(201710390021,201810390073,2018lxj025,2018lxj058,2018lxj066,2018lxj067)
【所属期刊栏目】中国水产科学
文献传递