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水稻膜联蛋白基因OsAnn8干旱和低温条件下表达模式以及CRISPR/Cas9定点编辑

2019-02-28分类号:S511

【作者】却志群  於紫蕾  沈春修  
【部门】宜春学院生命科学与资源环境学院江西省作物生长发育调控重点实验室  
【摘要】为了阐明水稻膜联蛋白基因家族成员OsAnn8在干旱和低温胁迫条件下的功能作用机制,通过荧光定量PCR技术对不同干旱和低温处理下的水稻叶片中OsAnn8基因进行转录水平上的定量分析,结果表明,OsAnn8基因在干旱胁迫处理前后表达量呈现出高-低-高的变化趋势,而在冷胁迫处理前后表达量则呈现出低-高-低-低的变化。随后,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsAnn8基因进行定点编辑,并借助农杆菌介导将OsAnn8基因靶位点的CRISPR/Cas9基因编辑植物表达载体导入转基因受体品种TP309,经潮霉素筛选后共获得32株转基因阳性植株,靶位点扩增测序峰图分析表明其中的2个单株出现了重叠峰,进一步的T载体克隆分别测序表明,这2个单株为单等位基因敲除,说明本研究已经成功获得了OsAnn8基因靶位点敲除的单等位突变体,不同类型的水稻OsAnn8基因突变体的创建,为水稻膜联蛋白基因家族成员OsAnn8在非生物胁迫条件下的功能研究奠定了材料基础。
【关键词】水稻  膜联蛋白  OsAnn8  荧光定量PCR  CRISPR/Cas9
【基金】2016年国家自然科学基金项目(31660379);; 2017年江西省自然科学基金项目(20171BAB214027);; 2018年江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ180845);2018年江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ180844);; 2018年江西省作物生长发育调控重点实验室开放课题项目(KFJJ201804)
【所属期刊栏目】华北农学报
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