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猪EIF2S3基因启动子的克隆、活性及转录调控元件分析

2018-12-28分类号:S828

【作者】龙熙  柴捷  赵久刚  蓝静  郭宗义  张廷焕  
【部门】重庆市畜牧科学院  农业部养猪科学重点实验室  
【摘要】旨在初步分析猪EIF2S3基因的启动子活性以及转录调控元件。利用生物信息学分析、PCR扩增、基因克隆、细胞转染、双荧光素酶活性分析等方法,获得了EIF2S3基因启动子区域的序列特征,构建了不同片段长度的EIF2S3基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体并分析了其荧光素酶活性,进而确定了EIF2S3基因的核心启动子区域以及关键的调控区域,最后还预测了关键调控区域的转录因子及其结合位点。结果表明,EIF2S3基因候选启动子区包含3个核心启动子以及2个Cp G岛;-706~+200 bp为EIF2S3基因的核心启动子区域,-706~-253 bp为EIF2S3基因启动子的关键调控区域,且发挥正向调节作用,而-1 563~-706 bp不存在任何对EIF2S3基因启动子活性有影响的调控元件; EIF2S3基因启动子的关键调控区域包含440个转录因子结合位点,且多个转录因子在此区域均有多个结合位点,如SP1、KLF4、Myo D1、Myo G、NFKB1。为进一步研究猪EIF2S3基因的表达机制奠定了基础。
【关键词】猪  EIF2S3  启动子  转录活性  转录因子
【基金】重庆市基本科研业务费(16435);; 重庆市科研院所绩效激励引导专项(cstc2017jxjl0065);; 国家生猪产业技术体系(CARS-35)
【所属期刊栏目】华北农学报
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