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利用CRISPR/Cas9构建斑马鱼tbx20基因突变体及其功能分析

2018-12-11分类号:Q78

【作者】朱哲  胡沛男  李伟明  祖尧  
【部门】上海海洋大学科技部海洋生物科学国际联合研究中心  上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室  上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心  
【摘要】转录因子TBX20在脊椎动物心脏的腔室发育和维护中起至关重要的作用。利用CRISPR/Cas9系统成功制备了斑马鱼tbx20突变鱼系,T7E1检测结果显示F_0敲除效率平均为42. 1%,测序分析F_1中突变种质遗传效率为36. 7%。F_2突变体中观察到心脏突变表型:48 hpf,心包腔肿大,静脉窦瘀血,环化异常,心脏结构变形; 3 dpf,心脏畸形拉伸成线状结构。原位杂交和qRT-PCR结果显示,突变体中vmhc表达上调,amhc和myl7表达下调。成功制备了斑马鱼tbx20突变体,结果表明tbx20纯合突变体心脏畸形,环化受到影响,为深入探究tbx20在早期心脏腔室分化过程中的作用奠定了基础。
【关键词】tbx20  斑马鱼  心脏发育  腔室分化  CRISPR/Cas9
【基金】国家自然科学基金(31501166);; 上海市教育委员会晨光计划项目(14CG49)
【所属期刊栏目】上海海洋大学学报
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