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UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究

2018-11-30分类号:Q78;R378

【作者】李国强  朱丽萍  朱丽臻  陈蕾蕾  颜世敢  
【部门】齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院/山东省微生物工程重点实验室  山东省临沂市相公中心医院  山东省农业科学院农产品研究所  
【摘要】[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037基因同源臂的氯霉素抗性基因取代c5032—c5037基因,在温度敏感型质粒p CP20作用下消除氯霉素抗性基因,构建基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,用PCR和基因测序验证基因敲除是否成功,测定有氧和厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中培养不同时间的菌液D600值。[结果]构建了CFT073Δc5032—c5037,PCR验证及基因测序结果均表明已成功敲除c5032—c5037基因;厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中生长比野生型菌株CFT073缓慢,且差异极显著(P
【关键词】尿道致病性大肠杆菌  Kgu S/KguR  c5032—c5037基因  Red重组系统
【基金】国家重点研发计划项目(2017YFC1601404);; 山东省自然科学基金项目(ZR2018LC003);; 国家自然科学基金项目(31470243);; 山东省重点研发计划项目(2014GSF120006);; 山东省研究生教育创新计划项目(SDYY14024)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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