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中华鳖GHITM cDNA基因克隆及表达分析

2018-11-20分类号:S917.4

【作者】熊钢  周先文  马晓  曾丹  陈贞年  康骊  王晓清  
【部门】湖南生物机电职业技术学院动物科技系  湖南农业大学动物科技学院  河南师范大学水产学院  
【摘要】为研究GHITM基因在中华鳖(Trionyx sinensis)胚胎发育及生长中的作用,本研究通过RT-PCR和RACE方法获得了中华鳖GHITM全长c DNA序列;采用实时荧光定量PCR对GHITM m RNA组织表达及不同温度孵化胚胎发育过程中的表达特性进行分析。结果显示,中华鳖GHITM c DNA序列长度为2650 bp,开放阅读框为1050 bp,5’非编码区为123 bp,3’非编码区为1477 bp,编码349个氨基酸,编码蛋白的等电点为10.01,分子量为37.12kDa。GHITM编码氨基酸序列由胞外区、跨膜区和胞内区组成,7个跨膜域组成跨膜区。GHITM编码氨基酸序列的同源性分析显示,中华鳖与锦龟(Chrysemys picta bellii)和绿海龟(Chelonia mydas)同属一个分支,3种鳄鱼构成一个分支,7种鸟类形成一个分支。实时荧光定量检测显示,GHITM基因在肝脏、肌肉和脑垂体中的表达水平较高,显著高于心脏、性腺、肠、肾脏和脾脏组织(P<0.05);低温胁迫孵化能显著抑制胚胎肝脏中GHITM基因的表达(P<0.05)。上述研究结果表明,GHITM基因与中华鳖生长和胚胎发育密切相关,其在中华鳖胚胎中的表达受孵化温度调节。本研究为探讨中华鳖胚胎发育和生长提供理论依据。
【关键词】中华鳖  GHITM  基因克隆  胚胎发育  组织表达
【基金】国家自然科学基金(31672640);; 湖南省自然科学基金(2017JJ3134;2016NK2115);; 湖南省教育厅基金项目(17C0935)共同资助~~
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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