鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF25截短蛋白的多克隆抗体制备与免疫原性分析
2018-11-15分类号:S943
【部门】中国水产科学研究院长江水产研究所
【摘要】鲫(Carassius auratus)造血器官坏死症是我国养殖鲫中新出现的一种传染性病毒性疾病,其病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cy HV-2),为研制针对该病的有效诊断试剂和疫苗,分析了Cy HV-2 ORF25基因编码蛋白的抗原表位,利用原核表达系统对Cy HV-2 ORF25编码蛋白富含抗原表位的区域进行截短表达,制备了抗Cy HV-2 ORF25编码蛋白的多克隆抗体,通过间接免疫荧光和免疫保护力测定等实验研究了截短表达蛋白的免疫原性。结果显示,原核表达的截短蛋白t ORF25分子质量约为28 k W,蛋白纯化后免疫日本大耳兔制备的多克隆抗体可特异性识别在Gi CB上增殖的Cy HV-2。将截短表达蛋白t ORF25免疫异育银鲫后,感染Cy HV-2,其相对免疫保护率达47%。
【关键词】鲤疱疹病毒Ⅱ型 ORF25截短蛋白 原核表达 多克隆抗体 免疫原性
【基金】中国水产科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2017HY-ZD0306,2016HY-ZD0501);; 国家自然科学基金(31802346);; 国家“现代农业产业技术体系建设专项资金”资助(CARS-45-16);; 武汉市关键技术攻关计划(2016020101010083);; 国家质检总局科技计划(2016IK116)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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